Você tem alguma dificuldade em preparar o gel de agarose?Vamos acompanharnosso técnico de laboratório na preparação do gel.
O processo de preparação do gel de agarose envolve as seguintes etapas:
Pesando pó de agarose
Pese a quantidade necessária de pó de agarose de acordo com a concentração desejada para seu experimento. As concentrações comuns de agarose variam de 0,5% a 3%. Concentrações mais altas são usadas para separar moléculas menores de DNA, enquanto concentrações mais baixas são para moléculas maiores.
Preparando solução tampão
Adicione o pó de agarose a um tampão de eletroforese apropriado, como 1× TAE ou 1× TBE. O volume do buffer deve corresponder ao volume de gel necessário para o seu experimento.
Dissolvendo a Agarose
Aqueça a mistura de agarose e tampão até que a agarose se dissolva completamente. Isso pode ser feito usando um micro-ondas ou uma placa quente. Mexa a solução intermitentemente para evitar que ferva. A solução de agarose deve ficar límpida, sem quaisquer partículas visíveis.
Resfriando a solução de agarose
Deixe a solução de agarose aquecida esfriar até cerca de 50-60°C. Agite a solução durante o processo de resfriamento para evitar a solidificação prematura.
Adicionando coloração de ácido nucleico (opcional)
Se quiser visualizar DNA ou RNA no gel, você pode adicionar uma mancha de ácido nucleico, como GelRed ou brometo de etídio, nesta fase. Ao manusear essas manchas, use luvas e tenha cuidado, pois podem ser tóxicas.
Fundindo o Gel
Despeje a solução de agarose resfriada em um molde de gel de eletroforese preparado. Insira um pente para criar poços de amostra, garantindo que o pente esteja seguro e que a solução seja distribuída uniformemente no molde.
Solidificação de Gel
Deixe o gel solidificar à temperatura ambiente, o que normalmente leva de 20 a 30 minutos, dependendo da concentração e da espessura do gel.
Rremovendo o pente
Assim que o gel estiver totalmente solidificado, remova cuidadosamente o pente para revelar os poços da amostra. Coloque o gel junto com o molde na câmara de eletroforese e cubra-o com a quantidade adequada de tampão de eletroforese, garantindo que o gel esteja totalmente submerso.
Preparando-se para eletroforese
Depois que o gel estiver pronto, carregue suas amostras nos poços e prossiga com o experimento de eletroforese.
Se você tiver algum problema com a preparação do gel, não hesite em nos contatar. Temos técnicos de laboratório profissionais disponíveis para se comunicar com você.
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Horário da postagem: 15 de outubro de 2024