A reação em cadeia da polimerase (PCR) é uma técnica de biologia molecular usada para amplificar fragmentos específicos de DNA. Pode ser considerada uma forma especial de replicação do DNA fora de um organismo vivo. A principal característica da PCR é a sua capacidade de aumentar significativamente vestígios de DNA.
Visão geral de um ciclo de reação em cadeia da polimerase
Imagem de Bioninja
Qual é o processo de ciclagem térmica em PCR?
A PCR consiste em três etapas básicas:
1. Desnaturação do ADN modelo: O ADN modelo é aquecido a cerca de 93°C durante um determinado período, fazendo com que o ADN de cadeia dupla se separe em cadeias simples, preparando-o para a ligação do iniciador no próximo ciclo de reacção.
2. Recozimento do ADN modelo e dos Primers: Após a desnaturação, a temperatura é reduzida para cerca de 55°C, permitindo que os iniciadores se liguem às sequências complementares no ADN modelo de cadeia simples.
3. Extensão dos Primers: A 72°C, o complexo molde-primer de DNA sofre extensão com a ajuda da DNA polimerase (como Taq DNA polimerase), usando dNTPs como substratos para sintetizar uma nova fita complementar baseada no DNA molde.
Máquina de PCR LIUYI de Pequim
Ao repetir os processos de desnaturação, recozimento e extensão, são geradas mais “fitas de replicação semiconservativas”, que podem servir como modelos para ciclos subsequentes. Cada ciclo leva cerca de 2 a 4 minutos, permitindo que o gene alvo seja amplificado milhões de vezes em 2 a 3 horas.
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Horário da postagem: 24 de setembro de 2024