Como realizar eletroforese de DNA em gel de agarose?

Aqui descreveremos como realizar a eletroforese em gel de agarose pelo nosso pesquisador no laboratório da Liuyi Biotech.

NOVO12web

Antes do experimento, precisamos verificar os aparelhos, reagentes e outros materiais e ferramentas experimentais necessários.

Preparação de aparelhos e materiais experimentais

Os aparelhos para eletroforese em gel de agarose

Célula de eletroforese horizontal (tanque/câmara), fonte de alimentação de eletroforese de média e baixa tensão, imagem de gel e sistema de análise.

Beijing liuyi Biotechnology Co., Ltd (Liuyi Biotech) oferece diferentes modelos de célula de eletroforese horizontal (tanque/câmara) e fonte de alimentação, bem como o sistema de documentação de gel.Os produtos da série modelo DYCP-31 são para eletroforese e os produtos da série DYY são a fonte de alimentação para eletroforese.Os produtos da série WD-9413 são o sistema de documentação de gel.Desde gel pequeno de 60 × 60 mm até gel maciço de 250 × 250 mm, podemos atender às suas diferentes necessidades de tamanho de gel.O modeloDYCP-32Cpode fazer o gel atingir o tamanho 250×250mm.ODYY-6Cé a nossa fonte de alimentação.Ele suporta uma saída de 400V, 400mA, 240W, que é nosso produto comum usado por nossos clientes. WD-9413BO Gel Image & Analysis System é usado para analisar e pesquisar gel, filmes e manchas após o experimento de eletroforese.É um aparelho básico com fonte de luz ultravioleta para visualizar e fotografar os géis corados com corantes fluorescentes como o brometo de etídio, e com fonte de luz branca para visualizar e fotografar os géis corados com corantes como o azul brilhante de Coomassie.

1

Os reagentes para eletroforese em gel de agarose

1.O meio: gel de agarose

2.O tampão: TAE (Tris-acetato, EDTA, ácido acético glacial) e TBE (Tris-borato, EDTA, ácido bórico).

3. O buffer de carregamento: 6 × buffer de carregamento de DNA (especial para amostra de DNA: EDAT, glicerina, xileno cianol e azul de bromofenol)

A tintura

O corante fluorescente como EB, Gelred, goldview, GenGreen, GenView, SYBRGreen

OConsumíveis

Pontas de pipeta de esterilização (10μL), pontas de pipeta (200μL), pontas de pipeta (1000μL), tubo de centrífuga de 200μL\500μL\1,5ml.

Marcador de DNA

Preparado de acordo com o peso molecular a ser testado.

O Gel correndo e observe

Primeiro precisamos preparar o gel de agarose.A concentração de agarose num gel dependerá dos tamanhos dos fragmentos de DNA a serem separados, com a maioria dos géis variando entre 0,5%-2%.Tomando nossoDYCP-31DNpor exemplo, você pode lançar gel pequeno, gel largo, gel longo e gel quadrado de acordo com os requisitos do experimento.Escolha a bandeja de gel necessária e insira o pente e, em seguida, despeje o gel de agarose aquecido no dispositivo de fundição de gel.

2

Então, depois que o gel ficar sólido, retire o pente com cuidado e suavidade e coloque a bandeja de gel no tanque tampão.Despeje a solução tampão no tanque tampão e faça todo o gel imerso no tampão.Carregue as amostras nos poços com uma pipeta padrão.Conecte oDYCP-31DNcom a fonte de alimentação de eletroforese corretamente e defina os parâmetros para executar o gel.

3

Visualize seus fragmentos de DNA em um transiluminador UV.

ADepois de executar o gel, você pode usar nosso modelo de sistema de análise e imagem de gelWD-9413Bobservar, analisar e tirar fotos do gel.A Liuyi Biotech também oferece transiluminador UV (Analisador UV) para observar o gel.Temos caixa preta tipo UV trmodelo de iluminador (Analisador UV)WD-9403A, 9403C, WD-9403F, modelo de transiluminador UV portátil (Analisador de UV)WD-9403Be transiluminador UV portátil (Analisador UV)WD-9403Epara você escolher.

4

Uma imagem de um gel pós-eletroforese

A marca Liuyi tem mais de 50 anos de história na China e a empresa pode fornecer produtos estáveis ​​e de alta qualidade em todo o mundo.Através de anos de desenvolvimento, vale a pena sua escolha!

Para mais informações sobre nós, entre em contato conosco por e-mail[e-mail protegido], [e-mail protegido].


Horário da postagem: 29 de abril de 2022